Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 321.2.50 - 50 мл
- Кат.№ 321.2.100 - 100 мл
- Кат.№ 321.2.250 - 250 мл
Принцип метода [1]:
- Мочевина + Н2О ← Уреаза → 2NH3 + CO2;
- NH3 + a-кетоглутарат + НАДН ← ГлДГ→ L-глутамат + НАД+ + Н2О.
Скорость окисления НАДН в НАД+, регистрируемая фотометрически при λ=340 нм, пропорциональна концентрации мочевины в пробе.
Исследуемый материал:
- Сыворотка или плазма крови. Образцы стабильны при температуре 2-8°С в течение трех суток. Гемолиз недопустим. Не использовать в качестве антикоагулянта оксалат.
- Моча суточная. Перед анализом образец развести бидистиллированной водой в соотношении 1:99. Образцы стабильны при температуре 2-8°С в течение четырех суток.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер, рН 8,0 (конечные концентрации в тесте):
- Трис - 100 ммоль/л;
- a-кетоглутарат - 15 ммоль/л.;
- Уреаза ³ 12000 МЕ/л;
- Глутаматдегидрогеназа ³ 1500 МЕ/л.
- Раствор НАДН (конечные концентрации в тесте):
- НАДН - 0,18 ммоль/л;
- Калибратор - 13,3 ммоль/л.
Реагенты готовы к использованию. Все компоненты набора стабильны при температуре хранения 2-8°С в течение 12 месяцев. Дата изготовления, срок годности, серия и номер по каталогу указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
- Линейность - от 0,5 до 33,3 ммоль/л.
- Коэффициент вариации - 5%.
Приготовление рабочего реагента:
Смешать буфер и раствор НАДН в соотношении 9:1. Рабочий реагент стабилен не менее 14 суток при температуре хранения 2-8°С в герметично закрытом флаконе в темноте.
Процедура анализа:
Непосредственно перед проведением анализа нагреть рабочий реагент до 37°С.
λ= 340 нм.
d = 1 см.
Температура измерения 37°С.
Измерение против воздуха.
Внести в кювету | Опытная проба | Калибратор |
---|---|---|
Рабочий реагент, мл | 1,0 | 1,0 |
Исследуемый образец, мл | 0,01 | --- |
Калибратор, мл | --- | 0,01 |
Смешать рабочий реагент и опытную пробу. Через 60 сек измерить экстинкцию (Е1). Еще через 60 сек повторно измерить экстинкцию (Е2). Вычислить величину DЕ пробы = Е2 - Е1. Провести аналогичную процедуру для калибратора и вычислить величину DЕ калибратора. |
Расчет:
Референтные пределы [1]:
1. Сыворотка (плазма) крови:
- Новорожденные/дети - 1,8 - 6,4 ммоль/л;
- Взрослые до 60 лет - 2,1 - 7,1 ммоль/л;
- Взрослые 60-90 лет - 2,9 - 8,2 ммоль/л.
2. Моча суточная: 430-710 ммоль/сутки.
Диагностическая информация:
1. Сыворотка (плазма) крови:
↑. Нарушение функции почек: 1) Снижение почечной перфузии (застойная сердечная недостаточность, истощение запасов солей и воды при рвоте, поносе, повышенном диурезе или потоотделении); шок в сочетании с повышенным катаболизмом белка (желудочно-кишечное кровотечение, острый инфаркт миокарда, стресс, ожоги); 2) Острые или хронические интерстициальные заболевания почек; 3) Обтурация мочевыводящих путей; 4) Диета с высоким содержанием белка.
↓. Диета с низким содержанием белка и высоким - углеводов; повышенная утилизация белка для син-теза (в поздние сроки беременности, у детей в возрасте до 1 года, при акромегалии); парентеральное питание, тяжелые заболевания печени, отравление лекарствами, нарушение всасывания (целиакия).
2. Моча суточная:
↑. Диета с повышенным содержанием белка; гипертиреоз; послеоперационный период.
↓. Здоровые растущие дети, беременные, диета с низким содержанием белка и высоким - углеводов, в период выздоровления, заболевания печени, токсемия, заболевания почек и почечная недостаточность любого происхождения.
Литература:
- Kassirer J.P. New Eng. J.Med. 1971, Vol.285, p. 385.
- Энциклопедия клин. лаб. тестов. Под ред.Н.Тица. Москва, Изд-во «Лабинформ», 1997, стр.337-338.
Параметры программирования:
Наименование набора реагентов | Мочевина UV-ПК (кровь) | Мочевина UV-ПК (моча) |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | автомат | автомат |
Метод измерения | КИН. или ДТК | КИН. или ДТК |
Длина волны, нм | 340 | 340 |
Измерение против | воздуха | воздуха |
Температура реакции, °С | 37 | 37 |
Фактор | - | - |
Концентрация стандарта | 13,3 | 1330 |
Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | 1000:10 | 1000:10 |
Количество измерений, не менее | 1 | 1 |
Время преинкубации, сек | 60 | 60 |
Время реакции, сек | 60 | 60 |
Единицы измерения | ммоль/л | ммоль/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 2,00 | 2,00 |
Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 | 0,00 |
Максимальное DЕ/мин | - | - |
Границы линейности | 0,5-33,3 | 0,5-33,3 |
Максимум нормы | 7,1 | - |
Минимум нормы | 2,1 | - |
Подтверждение линейности (да/нет) | нет | нет |