Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 305.1.100 - 100 мл
- Кат.№ 305.1.250 - 250 мл
- Кат.№ 305.1.500 - 500 мл
Принцип метода:
Эфиры холестерина + Н2О — холестеролэстераза → холестерин + жирные кислоты
Холестерин + О2 — холестеролоксидаза → холест-4-ен-3-ен-он + Н2О2
2 Н2О2 + 4-AAP + фенол — пероксидаза → квининомин + 4 Н2О
Концентрация квининомина, определенная фотометрически при λ= 500 нм, пропорцио-нальна концентрации общего холестерина в исследуемом образце.
Исследуемый материал:
Сыворотка, ЭДТА или гепаринизированная плазма крови. Гемолиз недопустим. Образцы стабильны при температуре 2-8°С в течение 5 суток или до трех месяцев при температуре -20°С. Избегать повторного замораживания и оттаивания образца.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер, рН 6,8
- PIPES - 75 ммоль/л;
- Фенол - 5 ммоль/л;
- 4-ААП - 0,5 ммоль/л;
- Раствор ферментов:
- Холестеролэстераза - 350 МЕ/л;
- Холестеролоксидаза - 350 МЕ/л;
- Пероксидаза - 1 000 МЕ/л.
- Калибратор - 5,17 ммоль/л.
Реагенты стабильны в течение 18 месяцев при температуре 2-8°С в темноте. Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
- Линейность - от 0,5-25,8 ммоль/л;
- Значение коэффициента вариации - 5 %.
Подготовка реагентов:
Для приготовления рабочего реагента смещать буфер и раствор ферментов в соотношении 50 : 2. Полученный реагент стабилен не менее 30 суток при температуре 2-8°С в темноте.
Процедура анализа:
Внести в пробирку | Опытная проба | Калибратор | Контроль на реактивы |
---|---|---|---|
Рабочий реагент, мл | 2,0 | 2,0 | 2,0 |
Исследуемый образец, мл | 0,02 | --- | --- |
Калибратор, мл | --- | 0,02 | --- |
Бидистиллированная вода, мл | --- | --- | 0,02 |
Смешать и инкубировать 10 минут при температуре 37°С или 15 минут при температуре 18-25°С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против контроля на реактивы при λ = 500 (490-520) нм и d = 1 см. Окраска стабильна в течение 2-х часов. |
Расчет:
Референтные пределы:
- Нормальные показатели - до 5,17 ммоль/л;
- Пограничные показатели - 5,17 -6,5 ммоль/л;
- Патологические показатели - свыше 6,5 ммоль/л.
Диагностическая информация [2]:
↑. Семейная или полигенная гиперлипопротеинемия типа IIA и IIВ, семейная дис-b-липопротеинемия (тип III), семейная комбинированная гиперлипидемия, гиперлипо-протеинемия типов I, IV, V и гипер-a-липопротеинемия ( от легкого до умеренного повышения), вторичные гиперлипопротеинемии при заболеваниях печени, внутри- и внепеченочном холестазе, гломерулонефрите, нефротическом синдроме, ХПН, злокачественных опухолях поджелудочной железы и простаты, гипотиреозе, подагре, ИБС, беременности, диабете, алкоголизме, анальбуминемии, дисглобулинемии, гликогенозы типа I, III и VI, синдром Вернера, нейрогенная анорексия, идиопатическая гиперкальциемия, острая перемежающаяся порфирия, изолированный дефицит СТГ.
↓. Дефицит a-липопротеина, гипо- и абеталипротеинемия, некроз печеночных клеток, злокачественная опухоль печени, гипертиреоз, нарушение всасывания, нарушение питания, мегалобластные анемии, сидеробластическая анемия, талассемия, тяжелые острые забо-левания, обширные ожоги, хронические обструктивные заболевания легких, умственная отсталость, ревматоидный артрит, лимфангиоэктазия кишечника.
Литература:
- Trinder P., Ann. clin. Biochem., 1969, vol. 6, p.24.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). «Лабинформ», Москва,1997, стр. 509-510.
Параметры программирования
Наименование набора реагентов | ХОЛЕСТЕРИН |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой |
Метод измерения | КТ |
Длина волны, нм | 500 (490-520) |
Измерение против | реагент бланка |
Температура реакции, °С | 37 |
Фактор | - |
Концентрация стандарта | 5,17 |
Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | 1000:10 |
Количество измерений, не менее | 1 |
Время преинкубации, сек | - |
Время реакции, сек | 600 |
Единицы измерения | ммоль/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 0,30 |
Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 |
Максимальное DЕ/мин | - |
Границы линейности | 0,5-25,8 |
Максимум нормы | 6.5 |
Минимум нормы | 0.0 |
Подтверждение линейности (да/нет) | нет |