Только для IN VITRO диагностики!
-
Кат.№ 314.3.200 - 200 определений при конечном объеме 4,8 мл
Принцип метода [1]:
α-амилазы расщепляет крахмал по Литнер с образованием продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. Уменьшение интенсивности окраски йод-крахмального комплекса в единицу времени пропорциональна активности фермента.
Исследуемый материал [2]:
- Сыворотка крови. Хранить при температуре 2-8ºС не более 30 суток.
- Моча. Образцы нестабильны в кислой среде. Довести рН образца до слабощелочного значения перед хранением. Хранить при температуре 2-8ºС не более 7 суток.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер фосфатный, 200 ммоль/л, рН 6,9, 105 мл;
- Субстрат (крахмал по Литнер), 4,5 мл;
- Йод, 35 ммоль/л, 7 мл;
- Калий фтористый, 4,3 моль/л, 14 мл;
- Соляная кислота, 1,8 моль/л, 50 мл.
Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при температуре 2-8ºС.
Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
Линейность реакции сохраняется в течение 10 минут.
Значение коэффициента вариации - не более 10 %.
Приготовление рабочего реагента:
Рабочий раствор субстрата: смешать Буфер и Субстрат в соотношении 24:1. Полученный реагент стабилен 5 дней при хранении при 2-8 ºС. Рабочий раствор йода: смешать дистиллированную воду, раствор йода и раствор фтористого калия в соотношении 7:1:2. Раствор стабилен не менее месяца при комнатной температуре при хранении в темноте. Рабочий раствор соляной кислоты: смешать дистиллированную воду и раствор соляной кислоты в соотношении 15:1. Реагент стабилен.
Процедура анализа:
Поместить в пробирки | Опытная проба, мл | Контрольная проба, мл |
---|---|---|
Рабочий раствор субстрата | 0,5 | 0,5 |
Инкубировать в водяной бане при 37 ºС 5 мин | ||
Исследуемый образец | 0,01 | – |
Смешать и инкубировать в водяной бане при 37 ºС 5 мин | ||
Рабочий раствор соляной кислоты | 4,0 | 4,0 |
Исследуемый образец | – | – |
Рабочий раствор йода | 0,3 | 0,3 |
Смешать и измерить оптическую плотность опытной пробы (Еопыт) и контрольной пробы (Еконтр) против воды при длине волны 630-690 нм и d = 1 см. |
Расчет:
Референтные пределы [2]:
- Сыворотка/плазма - 3,3- 8,9 мг/(с л),
- Моча - до 44 мг/(с л).
Диагностическая информация [2]:
- Сыворотка крови:
Активность -амилазы у детей первых двух месяцев низкая; она повышается до уровня взрослых к концу первого года жизни.
↑. Паротит, панкреатит, обтурационная и стронгуляционная непроходимость или инфаркте кишки, эктопическая беременность, перфорация полового органа, заболевания желчных путей всех типов, диабетический кетоацидоз, киста или псевдокиста поджелудочной железы, перитонит, макроамилаземия, некоторые опухоли легких и яичников, почечная недостаточность, эндоскопическая ретроградная холангиопанкреатография, абдоминальная травма, повреждение черепа, вирусные инфекции, состояния после операции, алкоголь.
←. Недостаточность поджелудочной железы, выраженный муковисцидоз, тяжелое поражение печени, панкреатэктомия. - Моча суточная:
См. Сыворотка крови. Однако, значения могут быть нормальными или пониженными при почечной недостаточности макроамилаземии. Амилаза в моче может оставаться повышенной в течение 2 недель после приступа острого панкреатита и может предположить образование псевдокисты.
Литература:
- Rauscher E., et al., Ber.Osster.Ges.Klin.Chem. 1981, vol.4, p.150.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). "Лабинформ", Москва,1997,стр.21-22.