Назначение
Реагент для подсчета тромбоцитов предназначен для подсчета тромбоцитов ручным методом в камере Горяева.
Проведение определения
Для подсчета тромбоцитов предпочтительнее использовать венозную кровь. В качестве антикоагулянта рекомендуется применять ЭДТА. При взятии капиллярной крови из пальца высока вероятность агрегации тромбоцитов. Перед исследованием необходимо убедиться в отсутствии сгустков крови.
Исследуемую кровь разводят в 200 раз, для этого в сухую пробирку набирают 4 мл реагента и 0,02 мл крови. Перемешивают и оставляют на 20-30 мин для гемолиза эритроцитов. Подготавливают камеру Горяева и заполняют ее перемешанной разведенной кровью с реагентом. Счетную камеру помещают во влажную среду (чашка Петри с влажной фильтровальной бумагой) на 5 мин для оседания тромбоцитов. Используется объектив 40х, производят подсчет тромбоцитов в 25 больших квадратах счетной камеры. Тромбоциты выглядят как мелкие, хорошо преломляющие свет образования.
Расчет числа тромбоцитов в 1 мкл крови производят по формуле:
где
Х - число тромбоцитов в 1 мкл крови,
а - число тромбоцитов, сосчитанных в 25 больших квадратах счетной камеры,
200 - разведение крови,
25 - число больших квадратов,
250-1 мм - объем одного большого квадрата.
Практически число сосчитанных тромбоцитов умножают на 2000. В пересчете на 1 л крови умножают на 1000000.
Примечание. Вся используемая стеклянная посуда и камера Горяева должны быть тщательно вымыты, иначе грязевые и пылевые частицы, сходные по размеру с тромбоцитами, могут быть ошибочно учтены при подсчете.
Условия хранения и эксплуатации
Хранение реагента должно проводиться при температуре от (+2°С до +12°С) в крытых вентилируемых помещениях вдали от кислот и щелочей, не допуская воздействия прямых солнечных лучей, в течение всего срока годности (1 год).
Краситель стабилен после вскрытия флакона в течение всего срока годности при условии достаточной герметизации флакона.