Назначение
Набор реагентов для окраски по Нохту, далее по тексту - краситель, предназначен для применения в качестве красителя форменных элементов крови при окраске препаратов периферической крови.
Состав
Краситель представляет собой 1,0% раствор сухого красителя азур II и эозина - 2 флакона (по 0,5 л) либо 4 флакона (по 0,25 л).
Подготовка к анализу
Приготовление буферного раствора
Для приготовления буферного раствора с рН 6,8 - 7,2 рекомендуется буферную смесь (производства НПФ «АБРИС+») развести в 3 л дистиллированной воды. Полученный раствор использовать для разведения красителя и промывки стекол.
Проведение определения
Мазки необходимо зафиксировать метанолом или раствором фиксатора-красителя по Май-Грюнвальду или типа Лейшмана в течение 2 -3 мин. После окончания фиксации следует ополоснуть препараты в буферном растворе. Уложить препараты мазками кверху на стеклянный мостик для окраски. Непосредственно перед окраской приготовить рабочий раствор красителя (на 100 мл): смешать 25 мл раствора 1, 20 мл раствора 2 и 55 мл забуференной воды (пропорции вновь приготовленных растворов необходимо подбирать эмпирически, соотношения растворов 1 и 2 - 4:4, 4:5, 4:6).
На зафиксированные мазки крови налить рабочий раствор красителя, по истечении 25-45 мин (в зависимости от температуры воздуха) препараты промыть буферным раствором, высушить на воздухе и микроскопировать.
Окраска форменных элементов крови должна быть следующей:
- ЭРИТРОЦИТЫ - розовые, розовые с серым или бежевым оттенком, бежево-коричневые;
- ТРОМБОЦИТЫ- розово-фиолетовые или фиолетовые;
- ЯДРА ЛИМФОЦИТОВ, МОНОЦИТОВ И НЕЙТРОФИЛОВ - фиолетовые;
- ЦИТОПЛАЗМА ЛИМФОЦИТОВ - голубая, серо-голубая или сине-голубая;
- ЦИТОПЛАЗМА МОНОЦИТОВ- серо-голубая;
- ЦИТОПЛАЗМА НЕЙТРОФИЛОВ - бледно-розовая или розово-серая;
- ЗЕРНИСТОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ - фиолетовая или красно-фиолетовая;
- ЗЕРНИСТОСТЬ ЭОЗИНОФИЛОВ - оранжево-красная, розово-красная или розово-фиолетовая;
- ЗЕРНИСТОСТЬ БАЗОФИЛОВ - фиолетовая.