Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 303. 1.100 - 100 определений (2 мл)
- Кат.№ 303. 1.250 - 250 определений (5 мл)
Принцип метода [1]:
Определение содержания антистрептолизина О (АСО) основано на взаимодействии АСО исследуемой пробы с молекулами стрептолизин-О (СО) человека, иммобилизованными на поверхности латексных частиц. При смешивании СО латекса с сывороткой крови, содержащей АСО в концентрации превы-шающей 200 МЕ/мл, в результате реакции между СО и АСО развивается визуально регистрируемая агглютинация латексных частиц, что свидетельствует о положительной реакции пробы [1].
Исследуемый материал [2]:
Сыворотка крови. Использование гемолизированных и липемичных образцов недопустимо. Образцы, содержащие частицы фибрина, перед анализом необходимо отцентрифугировать. Срок хранения исследуемых образцов при температуре 2-8°С не более 2 суток.
Состав набора и условия хранения:
- СО латекс
- Буфер
- Позитивный калибратор - концентрация АСО > 200 МЕ/мл
- Пограничный калибратор - концентрация АСО ~ 200 МЕ/мл
- Негативный калибратор - концентрация АСО < 200 МЕ/мл
- Тест-пластина и шпатели.
Реагенты стабильны при температуре хранения 2-8°С в течение 18 месяцев. Дата изготовления, срок годности, серия и номер по каталогу указаны на упаковке набора.
Подготовка реагентов к процедуре анализа:
Оптимальная температура реагентов и окружающей среды при проведении анализа 22-25°С. При температуре ниже 18°С возможно получение ложных результатов.
СО-латекс перед использованием следует перемешать осторожным встряхиванием.
Анализ:
I. Качественное определение:
Поместить в индивидуальные лунки тест-пластины калибраторы и исследуемые образцы сыворотки в объеме 20 мкл. Внутрь каждой лунки добавить по 20 мкл СО латекса. Быстро перемешать содержимое капель исследуемого образца и СО латекса в каждой лунке индивидуальным шпателем до гомогенного состояния.
Перемешивать реакционную смесь круговыми движениями тест-пластины на механической орбитальной мешалке или вручную со скоростью 80-100 об/мин в течение 2 минут. Процесс агглютинации следует регистрировать в течение 1 минуты после окончания движения тест-пластины. Существенное увеличение временного промежутка между остановкой тест-пластины и фиксацией результата может привести к регистрации ложной агглютинации, возникающей в процессе подсыхания реакционной смеси.
Интерпретация результатов:
- Четко видимые агрегаты латексных частиц - концентрация АСО > 200 МЕ/мл.
- Мелкие агрегаты - концентрация АСО ~ 200 МЕ/мл.
- Равномерно-гомогенная молочная суспензия - концентрация АСО < 200 МЕ/мл.
II. Полуколичественное определение:
Приготовить разведения исследуемых проб с помощью буфера в соответствии с таблицей
Таблица
| Соотношение исследуемая проба/ буфер | Содержание АСО (МЕ/мл), (С) |
|---|---|
| 1 : 1 | 400 < С < 600 |
| 1 : 2 | 600 < С < 800 |
| 1 : 3 | 800 < С < 1000 |
| 1 : 4 | 1000 < С < 1200 |
| и т.д. |
Провести анализ полученных разведений в соответствие с п. I.
Конечным результатом анализа считать пробу с наибольшим разведением, давшим реакцию агглютинации.
Референтные пределы [3]:
- до 200 МЕ/мл.
Специфичность:
Используемый в наборе реагентов СО антиген обладает высокой специфичностью по отношению к АСО человека и не проявляет перекрестных реакций с другими белками сыворотки в условиях тестирования.
ВНИМАНИЕ!
Не допускать замораживания набора при хранении, так как это приводит к утрате способности СО латекса к реакции агглютинации, а следовательно к получению ложно-отрицательных результатов.
Диагностическая информация [3]:
Высокие титры АСО указывают на острую стрептококковую инфекцию, поэтому в этом случае тест необходимо повторить через неделю, чтобы выявить динамику заболевания. Повышенное содержание AСO в сыворотке крови характерно для пациентов, страдающих скарлатиной, острым ревматоидным артритом, тонзиллитом и другими стрептококковыми инфекциями, а также для клинически здоровых бактерионосителей.
Литература:
- Plotz and Singer, Amer. J. Med., 1979, vol.22.
Внимание!
Для дезинфекции слайд-пластины следует использовать дезинфектанты на основе свободного хлора - такие, как "Хлорамикс", "ДП-2Т", "Жавель солид", «Хлорапин".
Недопустимо использование средств на основе перекиси водорода и фтора, в частности "Абсолюцид окси".