Назначение
Фиксатор-краситель «Диахим - Гемистейн-Л» (типа Лейшман) в растворе, предназначен для применения в качестве фиксатора и красителя форменных элементов крови.
Состав
Фиксатор-краситель представляет собой 0,15% раствор сухого красителя эозин метиленовый синий типа Лейшмана в метаноле - 1 флакон (1 л).
Подготовка к анализу
Приготовление буферного раствора
Для приготовления буферного раствора с рН 6,8-7,2 рекомендуется буферную смесь (производства НПФ «АБРИС+»), развести в 3 литрах дистиллированной воды. Полученный раствор использовать для разведения красителя и промывки стекол.
Проведение определения
1 способ
Приготовление рабочего раствора. Непосредственно перед определением приготовить рабочий, для чего разбавить фиксатор-краситель «Диахим-ГемиСтейн-Л» (типа Лейшман) буферным раствором в соотношении 1: 2. Полученный разбавленный раствор фиксатора-красителя можно хранить в течение 6 часов.
Проведение определения. На нефиксированные мазки крови налить неразбавленный раствор фиксатора-красителя «Диахим-ГемиСтейн-Л (типа Лейшман) так, чтобы он покрыл весь мазок. Через 1 мин. смыть фиксатор-краситель буферным раствором и далее красить рабочим раствором (разбавленным раствором фиксатора-красителя«Диахим-ГемиСтейн-Л (типа Лейшман) в течение 10-12мин. По истечении этого времени препараты промыть буферным раствором, высушить на воздухе и микроскопировать.
2 способ
Приготовление рабочего раствора. Непосредственно перед определением приготовить рабочий раствор красителя азур-эозин по Романовскому («Диахим-ГемиСтейн-Р-профессионал»), для чего смешать раствор красителя («Диахим-ГемиСтейн-Р-профессионал»), с буферным раствором в соотношении 1:10 - 1:12. Полученный рабочий раствор красителя можно хранить в течение 6 часов.
Проведение определения. На нефиксированные мазки крови налить неразбавленный раствор фиксатора-красителя «Диахим-ГемиСтейн-Л (типа Лейшман) так, чтобы он покрыл весь мазок. Через 2 мин. слить фиксатор-краситель и далее красить рабочим раствором красителя «Диахим-ГемиСтейн-Р-профессионал» (по Романовскому) в течение 10-12мин. По истечении этого времени препараты промыть буферным раствором, высушить на воздухе и микроскопировать.
Окраска форменных элементов крови должна быть следующей:
- ЭРИТРОЦИТЫ - розовые, розовые с серым или бежевым оттенком, бежево-коричневые;
- ТРОМБОЦИТЫ - розово-фиолетовые или фиолетовые;
- ЯДРА ЛИМФОЦИТОВ, МОНОЦИТОВ И НЕЙТРОФИЛОВ - фиолетовые;
- ЦИТОПЛАЗМА ЛИМФОЦИТОВ - голубая, серо-голубая или сине-голубая;
- ЦИТОПЛАЗМА МОНОЦИТОВ -серо-голубая;
- ЦИТОПЛАЗМА НЕЙТРОФИЛОВ - бледно-розовая или розово-серая;
- ЗЕРНИСТОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВА - фиолетовая или красно-фиолетовая;
- ЗЕРНИСТОСТЬ ЭОЗИНОФИЛОВ - оранжево-красная, розово-красная или розово-фиолетовая;
- ЗЕРНИСТОСТЬ БАЗОФИЛОВ - фиолетовая.