Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 320.1.50 - 50 мл
Принцип метода:
Молочная кислота + О2 — лактатоксидаза → пируват + 2Н2О2;
Н2О2 + 4-AAP + 4-хлорфенол — пероксидаза → квининомин + 4 Н2О
Концентрация квининомина, определенная фотометрически при λ = 500 нм, пропорцио-нальна концентрации молочной кислоты в исследуемом образце.
Исследуемый материал:
- Сыворотка, гепаринизированная или фторид/оксалат плазма крови. Отделить от клеток для предупреждения потерь в течение 15 минут. Избегать применения жгута. Гемолиз недопустим. Образцы хранить на льду и исследовать в день взятия пробы.
- Моча. Собирать в темную посуду на льду. Исследовать в день взятия пробы.
- Ликвор. Исследовать немедленно во избежание ложно низких результатов.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер, рН 6,8 (конечные концентрации в тесте):
- Pipes -50 ммоль/л;
- 4-хлорфенол - 6 ммоль/л.
- Раствор ферментов (конечные концентрации в тесте):
- 4-ААП - 0,4 ммоль/л;
- Лактатоксидаза > 200 МЕ/л;
- Пероксидаза > 2 000 МЕ/л;
- Калибратор - 3,34 ммоль/л.
Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при температуре 2-8°С в темноте. Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
- Линейность - от 0,3 до 16,6 ммоль/л.
- Значение коэффициента вариации - 5 %.
Приготовление реагента:
Смешать буфер и раствор ферментов в соотношении 9:1. Рабочий реагент стабилен не менее 30 дней при температуре хранения 2-8°С или 2 недели при 18-25°С.
Процедура анализа:
Внести в пробирку | Опытная проба | Калибратор | Контроль на реактивы |
---|---|---|---|
Рабочий реагент, мл | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
Исследуемый образец, мл | 0,01 | --- | --- |
Калибратор, мл | --- | 0,01 | --- |
Вода, мл | --- | --- | 0,01 |
Смешать и инкубировать 5 минут при температуре 37°С или 10 минут при температуре 18-25°С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против контроля на реактивы при λ = 500 (490-520) нм и d = 1 см. Окраска стабильна в течение 60 минут. |
Расчет:
Референтные пределы:
- венозная кровь - 0,5-2,2 ммоль/л;
- артериальная кровь - 0,5-1,6 ммоль/л;
- моча суточная - 5,5 - 22,0 ммоль/сутки;
- ликвор - 1,1-2,4 ммоль/л.
Внимание! Контакт рабочего реагента с кожей и слюной, а также использование для стерилизации посуды перекисей (являющихся одним из основных компонентов многих дезинфицирующих средств) проводит к получению завышенных результатов. Не прикасаться голыми руками к рабочему фрагменту наконечников автоматических дозаторов и пипеток!
Диагностическая информация:
1. Сыворотка (плазма) крови, моча суточная.
↑. Лактоацидоз I типа (повышенный уровень молочной кислоты, отсутствие выраженного ацидоза, нормальное соотношение лактат/пируват); физическая нагрузка, гипервентиляция, глюкагон, гликогенозы, тяжелая анемия, введение инсулина, синдром Рейе.
Лактоацидоз II A типа, связанный с гипоксией (увеличено соотношение лактат/пируват): любые состояния с неадекватным поступлением кислорода в ткани, острое кровотечение, тяжелая острая сердечная недостаточность, или другие причины сосудистого коллапса, заболевания сердца с цианозом или другие причины острой гипоксии, экстракорпоральное кровообращение.
Лактоацидоз II В типа, идиопатический (увеличено соотношение лактат/пируват): легкая уремия, инфекции, цирроз, третий триместр беременности, тяжелые сосудистые заболевания, лейкозы, анемии, хронический алкоголизм, подострый бактериальный эндокардит, полиомиелит, диабет.
2. Ликвор.
↑. Уменьшение притока крови к мозгу или ее оксигенация, повышенное внутричерепное давление, травма, судороги, внутричерепное кровоизлияние, абсцесс мозга, рассеянный склероз, первичный или метастатический рак ЦНС, гипокапния, бактериальный и туберкулезный менингит.
Литература:
- Z. Clin. Chem. and Clin. Biochem., 1972, vol. 8, p.658.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица) «Лабинформ», Москва,1997, стр.289-290.
Параметры программирования:
Наименование набора реагентов | Молочная кислота |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой |
Метод измерения | КТ |
Длина волны, нм | 500 (490-520) |
Измерение против | реагент бланка |
Температура реакции, °С | 37 |
Фактор | - |
Концентрация стандарта | 3,34 |
Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | 1000:10 |
Количество измерений, не менее | 1 |
Время преинкубации, сек | - |
Время реакции, сек | 300 |
Единицы измерения | ммоль/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 2,00 |
Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 |
Максимальное DЕ/мин | - |
Границы линейности | 0,3-16,6 |
Максимум нормы | 2,2 |
Минимум нормы | 0,5 |
Подтверждение линейности (да/нет) | нет |