Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 304.3.250 - 250 мл;
- Кат.№ 304.3.500 - 500 мл
- Кат.№ 304.3.1000 - 1000 мл ;
- Кат.№ 304.3.5000 - 5000 мл.
Принцип метода:
β-D-глюкоза + О2 + Н2О — глюкозооксидаза ← глюконовая кислота + Н2О2
2 Н2О2 + 4-AAP + фенол — пероксидаза → квининомин + 4 Н2О
Концентрация квининомина пропорциональна концентрации β-D-глюкозы в пробе.
Исследуемый материал:
- Сыворотка крови. Быстро отделить от клеток для предупреждения потерь. Образцы стабильны в течение 8 часов при температуре 18-25°С или 3 суток при 2-8°С.
- Плазма крови. Консервант - фторид натрия или иодацетат. Образцы стабильны в течение 24 часов при температуре 18-25°С.
- Цельная кровь. Консервант - фторид натрия. В качестве антикоагулянта использовать гепарин.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер, рН 7,5:
- Na2HPO4 - 150 ммоль/л;
- Фенол - 11 ммоль/л;
- 4-ААП - 0,77 ммоль/л;
- Раствор ферментов:
- Глюкозооксидаза - 15 000 МЕ/л;
- Пероксидаза - 1 000 МЕ/л.
- Калибратор - 5,55 ммоль/л.
- Кислота хлорная (концентрат).
Компоненты набора стабильны в течение 24 месяцев при температуре 2-8°С в темноте.
Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
- Линейность - от 1,0 до 30 мкмоль/л
- Коэффициент вариации - не более 5%.
Приготовление реагента:
- Для приготовления рабочего реагента смещать буфер и раствор ферментов в соотношении 50 : 1. Полученный реагент стабилен в течение 30 суток при температуре 2-8°С в темноте.
- Кислоту хлорную развести до указанного на этикетке объема дистиллированной водой.
Процедура анализа:
А. Сыворотка или плазма крови.
| Внести в пробирку | Опытная проба | Калибратор | Контроль на реактивы |
|---|---|---|---|
| Рабочий реагент, мл | 2,0 | 2,0 | 2,0 |
| Исследуемый образец, мл | 0,01 | --- | --- |
| Калибратор, мл | --- | 0,01 | --- |
| Вода, мл | --- | --- | 0,01 |
| Смешать и инкубировать 20 минут при температуре 37°С или 30 минут при температуре 18-25°С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против контроля на реактивы при λ = 500 (490-520) нм и d = 1 см. Окраска стабильна в течение 2 часов. | |||
Б. Цельная кровь.
| Внести в пробирку | Опытная проба | Калибратор | Контроль на реактивы |
|---|---|---|---|
| Хлорная кислота, мл | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| Исследуемый образец, мл | 0,1 | --- | --- |
| Калибратор, мл | --- | 0,1 | --- |
| Вода, мл | --- | --- | 0,1 |
| Смешать и инкубировать 10 минут при температуре 18-25°С. Центрифугировать исследуемые образцы при 900 g в течение 10 минут. Для дальнейшего анализа использовать прозрачный супернатант. | |||
| Внести в пробирку | Опытная проба | Калибратор | Контроль на реактивы |
| Рабочий реагент, мл | 2,0 | 2,0 | 2,0 |
| Супернатант. образца, мл | 0,1 | --- | --- |
| Супернатант калибратора мл | --- | 0,1 | --- |
| Супернатант воды, мл | --- | --- | 0,1 |
| Смешать и инкубировать 20 минут при температуре 37°С или 30 минут при температуре 18-25°С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против контроля на реактивы при λ= 500 (490-520) нм и d = 1 см. Окраска стабильна в течение 1 часа. | |||
Расчет:
Референтные пределы:
- Сыворотка или плазма крови
- Новорожденные - 1,7-3,3 ммоль/л;
- Дети - 3,3-5,6 ммоль/л;
- Взрослые - 4,1-5,9 ммоль/л.
- Цельная кровь.
Содержание глюкозы в цельной крови составляет 90% от содержания глюкозы в сыворотке (плазме) крови.
Диагностическая информация:
↑. Первичное: сахарный диабет. Физиологическое: физическая нагрузка, шок, ожоги. Эндокринные заболевания: феохромоцитома, тиреотоксикоз, акромегалия, гигантизм, синдром Кушинга, глюкагонома, Заболевания поджелудочной железы: острый и хронический панкреатит, панкреатит при паротите, муковисцидозе, гемохроматозе, опухоль поджелудочной железы. Связанное с другими заболеваниями:кровоизлияние в мозг, острый инфаркт миокарда, хронические заболевания печени или почек.
↑. Заболевания поджелудочной железы: Опухоль островковых клеток, дефицит глюкагона. Опухоли: рак надпочечника, рак желудка, фибросаркома. Тяжелые заболевания печени.Эндокринные заболевания: гипопитуитаризм, болезнь Аддисона, гипотиреоз.
Литература:
- Trinder P., Ann. clin. Biochem., 1969, vol. 6, p.24.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н. У. Тица). «Лабинформ», Москва,1997, стр. 160.
Параметры программирования:
| Наименование набора реагентов | Глюкоза GOD-PAP |
| Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой |
| Метод измерения | КТ |
| Длина волны, нм | 500 (490-520) |
| Измерение против | реагент бланка |
| Температура реакции, °С | 37 |
| Фактор | - |
| Концентрация стандарта | 5,55 |
| Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | 1000:5 |
| Количество измерений, не менее | 1 |
| Время преинкубации, сек | - |
| Время реакции, сек | 1200 |
| Единицы измерения | ммоль/л |
| Верхний предел реагент бланка, А | 2,00 |
| Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 |
| Максимальное DЕ/мин | - |
| Границы линейности | 1,0-30 |
| Максимум нормы | 5,9 |
| Минимум нормы | 4,1 |
| Подтверждение линейности (да/нет) | нет |