Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ С18.1.20 - 18 мл + 2 мл
- Кат.№ С18.5.20 - 5 х 18 мл + 5 х 2 мл
Принцип метода [1]:
пируват + НАДН + H+ ← ЛДГ → лактат + НАД+ Скорость окисления НАДН в НАД+, пропорциональна активности ЛДГ в пробе.
Исследуемый материал [2]:
Сыворотка или гепаринизированная плазма крови. Гемолиз недопустим. Образцы центрифугировать и исследовать немедленно. Охлаждение или замораживание образцов недопустимо.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер, рН 7,5 при 37ºС:
Na2HPO4 - 50 ммоль/л;
пируват - 0,6 ммоль/л; - Раствор НАДН:
НАДН - 0,18 ммоль/л;
Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при хранении при температуре 2-8ºС. Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
Линейность - от 25 до 810 МЕ/л (Вариант № 1) или от 50 до 1200 МЕ/л (Вариант № 2);
Коэффициент вариации - не более 5%.
Приготовление рабочего реагента:
Смешать содержимое флакона с буфером и содержимое флакона с раствором НАДН. Рабочий реагент стабилен в течение 24 часов при постоянной температуре хранения 2-8ºС.
Процедура анализа:
Непосредственно перед проведением анализа нагреть рабочий реагент до 37ºС.
λ = 340 нм.
d = 1 см.
Температура измерения 37ºС.
Измерение против воздуха.
Вариант № 1
Компоненты | Полумикроанализ, мкл | Микроанализ, мкл |
---|---|---|
Рабочий реагент | 500 | 300 |
Сыворотка крови | 10 | 6 |
Смешать и инкубировать при 37*С в течение 1 минуты. Измерить ΔЕ/мин в течение 3-х минут. Вычислить среднее значение ΔЕ/мин. Если значение ΔЕ/мин превышает величину 0,15 А/мин развести исследуемый образец физиологическим раствором, повторить анализ, а результат умножить на степень разведения. |
Вариант № 2
Компоненты | Полумикроанализ, мкл | Микроанализ, мкл |
---|---|---|
Рабочий реагент | 500 | 300 |
Сыворотка крови | 5 | 3 |
Смешать и инкубировать при 37*С в течение 1 минуты. Измерить ΔЕ/мин в течение 3-х минут. Вычислить среднее значение ΔЕ/мин. Если значение ΔЕ/мин превышает величину 0,075 А/мин развести исследуемый образец физиологическим раствором, повторить анализ, а результат умножить на степень разведения. |
Расчет:
- Вариант № 1: МЕ/л = 8095 x ΔЕ/мин.
- Вариант № 2: МЕ/л = 16030 x ΔЕ/мин.
Референтные пределы [2]:
- Новорожденные - 580 - 970 МЕ/л;
- Взрослые - 200 - 395 МЕ/л.
Диагностическая информация [2]:
↑↑↑. Мегалобластная и пернициозная анемии; интенсивный карциноматоз; вирусный гепатит; шок; гипоксия; крайняя гипертермия.
↑↑. Цирроз; механическая желтуха; почечные заболевания многих форм; болезни скелетной мускулатуры; неоплазии; застойная сердечная недостаточность.
↑. Любое повреждение клеток с потерей цитоплазмы; инфаркт миокарда и легкого; лейкемии; гемолитические анемии; не вирусный гепатит; серповидно-клеточное заболевание; лимфома; инфаркт почки; острый панкреатит.
↓. Генетически детерминированный дефицит субъединиц Н и М.
Литература:
- Weisshaar H.D., Med. Weit, 1975, vol. 26, p.387.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). "Лабинформ", Москва,1997, стр. 291.
Параметры программирования
Наименование набора реагентов | ЛДГ (Вариант № 1) | ЛДГ (Вариант № 2) |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой | любой |
Метод измерения | Кинетика | Кинетика |
Длина волны, нм | 340 | 340 |
Измерение против | воздуха | воздуха |
Температура реакции, ºС Температура реакции, ºС | 37 | 37 |
Фактор | - 8095 | - 16030 |
Концентрация стандарта | - | - |
Объем рабочего реагента (мкл) | 300 | 300 |
Объем исследуемого образца (мкл) | 6 | 3 |
Количество измерений, не менее | 3 | 3 |
Время преинкубации, сек | 60 | 60 |
Время реакции, сек | 60 | 60 |
Единицы измерения | МЕ/л | МЕ/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 2,00 | 2,00 |
Нижний предел реагент бланка, А | 1,00 | 1,00 |
Максимальное ΔЕ/мин | 0,075 | 0,075 |
Границы линейности | 25-810 | 25-810 |
Максимум нормы | 395 | 395 |
Минимум нормы | 200 | 200 |
Подтверждение линейности (да/нет) | да | да |