Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 311.2.200 - 200 определений (при конечном объеме пробы 3,5 мл).
Принцип метода[1]:
L-γ-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид + глицилглицин γ-ГТФ → L-γ-глутамилглицил-глицин + 5-амино-2-нитробензоат
Скорость образования 5-амино-2-нитробензоата, пропорциональна активности γ-ГТФ.
Исследуемый материал[2]:
Сыворотка крови. Образцы стабильны при температуре хранения 2-8ºС в течение 30 суток.
Состав набора и условия хранения:
- Буфер, рН 8,25, 80 мл:
Трис - 100 ммоль/л;
Глицилглицин - 150 ммоль/л. - Субстрат: L-γ-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид,
6 ммоль/л, 20 мл; - Уксусная кислота, 5,6 моль/л, 200 мл;
- Калибратор - р-нитроанилин, 0,75 ммоль/л, 2 мл.
Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при температуре 2-8ºС в темноте. Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
Линейность - от 5 до 240 МЕ/л.
Коэффициент вариации - не более 7%.
Приготовление рабочего реагента:
Смешать необходимое количество буфера и субстрата в соотношении 4:1.
Полученный реагент стабилен 20 дней при 2-8 ºС.
Процедура анализа:
| Внести в пробирки | Опытная проба, мл | Контроль на реактивы для пробы, мл | Калибратор, мл | Контроль на реактивы для калибратора, мл |
|---|---|---|---|---|
| Рабочий реагент | 0,5 | 0,5 | — | — |
| Сыворотка крови | 0,05 | — | — | — |
| Вода | — | — | 0,5 | 0,55 |
| Калибратор | — | — | 0,05 | — |
| Смешать и инкубировать при температуре 37ºС в течение 15 минут. | ||||
| Уксусная кислота, 5,6 моль/л | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| Вода | 2,0 | 2,0 | 2,0 | 2,0 |
| Сыворотка крови | — | 0,05 | — | — |
| Смешать. Измерить оптическую плотность пробы (Е пробы) и калибратора (Е калибратора) против соответствующих контролей на реактивы при λ = 405 (400-420) нм и d = 1 см. Окраска стабильна не менее 30 минут после окончания инкубации при предохранении от прямого солнечного света. При активности γ-ГТФ, превышающей 240 МЕ/л, исследуемый образец следует развести физиологическим раствором. При расчете активности учесть степень разведения. | ||||
Расчет
Референтные пределы
- Мужчины от 10,4 до 33,2 МЕ/л;
- Женщины от 8,8 до 22 МЕ/л
Диагностическая информация[2]:
↑↑. Обструктивные поражения печени и послепеченочная закупорка.
↑. Заболевания печени (воспаление, цирроз, space-occupying поражения), инфекционный мононуклеоз, пересадка почки, гипертиреоидизм, миотоническая дистрофия, сахарный диабет, панкреатит, заболевания печени, вызванные алкоголем.
↓. Гипотиреоз.
γ-ГТФ используется в качестве маркера рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатомы, поскольку ее уровни отражают ремиссии и рецидивы,. Фермент также применятся в диагностике различных патологий в соотношении: с холестерином липопроте-идов высокой плотности (злоупотребление алкоголем); щелочной фосфатазой (алкогольное поражение печени); аспартатаминотрансферазой (дифференциация неонатального гепатита от атрезии желчных путей).
Литература
- Szasz G., J.P.Persijn, et al. Z.Klin.Chem. Klin.Biochem., 1974, vol. 12, p.228.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). "Лабинформ", Москва,1997, стр. 170-171.
Параметры программирования
| Наименование набора реагентов | ГГТФ КТ |
| Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | полуавтомат |
| Метод измерения | КТ |
| Длина волны, нм | 405 (400-420) |
| Измерение против | бланка пробы |
| Температура реакции, ºС | - |
| Фактор | - |
| Концентрация стандарта | 50 |
| Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | - |
| Количество измерений, не менее | 1 |
| Время преинкубации, сек | - |
| Время реакции, сек | - |
| Единицы измерения | МЕ/л |
| Верхний предел реагент бланка, А | 2,00 |
| Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 |
| Максимальное ΔЕ/мин | - |
| Границы линейности | 5-240 |
| Максимум нормы | 33,2 |
| Минимум нормы | 8,8 |
| Подтверждение линейности (да/нет) | нет |