Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 325.1.250 - 250 мл.
Принцип метода [1]:
р-нитрофенилфосфат + Н2О ← Щелочная фосфатаза → р-нитрофенол + фосфат. Скорость образования р-нитрофенола пропорциональна активности щелочной фосфатазы.
Исследуемый материал [2]:
Сыворотка (плазма) крови. Образцы после немедленного охлаждения, стабильны при температуре 2-8ºС в течение 48 часов. Замораживание образцов недопустимо.
Состав набора и условия хранения:
- ДЭА буфер, рН 9,8:
диэтаноламин - 1 моль/л;
магний хлористый - 1 ммоль/л - Субстрат:
р-нитрофенилфосфат, 10 ммоль/л.
Компоненты набора стабильны в течение года при температуре 2-8ºС. Дата изготовления, серия, срок хранения и номер по каталогу указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
Линейность - от 20 до 700 МЕ/л.
Коэффициент вариации - не более 5%.
Приготовление рабочего реагента:
Смешать необходимое количество буфера и раствора субстрата в соотношении 9:1. Полученный реагент стабилен 30 суток при 2-8 º С в темноте.
Процедура анализа:
Непосредственно перед проведением анализа нагреть рабочий реагент до 37ºС.
λ = 405 (400-420) нм.
d = 1 см.
Температура измерения 37ºС.
Измерение против воздуха.
Внести в кювету | Макроанализ, мл | Полумикроанализ, мл | Микроанализ, мл |
---|---|---|---|
Рабочий реагент | 2,0 | 1,0 | 0,5 |
Сыворотка крови | 0,04 | 0,02 | 0,01 |
Смешать и инкубировать при 37ºС в течение 1 минуты. Измерить ΔЕ/мин в течение 3-х минут. Вычислить среднее значение ΔЕ/мин. Общее время реакции не должно превы-шать 5 минут. Если значение ΔЕ/мин превышает величину 0,25 А/мин развести исследуемый образец физиологическим раствором, повторить анализ, а результат умножить на степень разведения. |
Расчет:
МЕ/л = 2757 ΔЕ/мин
Референтные пределы [2]:
100-290 МЕ/л
Диагностическая информация [2]:
↑. При заживлении переломов; первичный и вторичный гиперпаратиреоидизм; остеомаляция; ювенильный рахит; метастазы рака в кости; остеогеннная саркома; миеломная болезнь; лим-фогранулематоз с поражением костей; болезнь Гоше с резорбцией костей; болезнь Педжета; синдром Кушинга; уремическая остеодистрофия; поражение почечных канальцев, сочетающееся с потерей фосфатов и/или кальция и приводящих к рахиту с вторичным гиперпаратиреоидизмом или без него; "почечный рахит", обусловленным витамин-D-резистентным рахитом, сочетающимся с вторичным гиперпаратиреоидизмом; инфекционный мононуклеоз; неосложненный внепеченочный холестаз; цитомегаловирусная инфекция у детей; холангит и холангиолит, гепатоцеллюлярный некроз с желтухой или без нее; портальный цирроз; абсцесс печени; первичная гепатоцеллюлярная карцинома; вторичный рак; активная регенерация (пролиферация гепатоцитов или желчных протоков); печеночные узелки (метастазы опухоли, кисты, паразиты, амилоид, туберкулез, саркоидоз, лейкемия); гепатиты, вызванные инфекцией, химикалиями, лекарствами, сердечной недостаточностью; хроническое употребление противосудорожных средств; внепеченочный сепсис; язвенный колит; регионарный энтерит; кишечные бактериальные инфекции; тиреотоксикоз; доброкачественная переходящая гиперфосфатаземия; инфаркт легкого и почки; панкреатит, присутствие изоферментов Реган или Нагао; прием фенитоина и алкоголя; индукция фермента.
↓. Гипотиреоидизм; цинга; выраженная анемия; квашиоркор; ахондроплазия; кретинизм; накопление радиоактивных веществ в костях; гипофосфатаземия; врожденная гипофосфатаземия; дефицит витамина В12 (пернициозная анемия); недостаток цинка и магния в пище.
Литература:
- Haussament T.U., Clin..Chim. Acta 1977, vol.35., p.271.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). "Лабинформ", Москва,1997, стр. 525-526.
Параметры программирования
Наименование набора реагентов | ЩЕЛОЧНАЯ ФОСФАТАЗА КИНЕТИКА |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой |
Метод измерения | Кинетика |
Длина волны, нм | 405 (400-420) |
Измерение против | воздуха |
Температура реакции, ºС | 37 |
Фактор | 2757 |
Концентрация стандарта | – |
Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | 1000:20 |
Количество измерений, не менее | 3 |
Время преинкубации, сек | 60 |
Время реакции, сек | 60 |
Единицы измерения | МЕ/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 1,00 |
Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 |
Максимальное ΔЕ/мин | 0,250 |
Границы линейности | 20-700 |
Максимум нормы | 290.0 |
Минимум нормы | 0.0 |
Подтверждение линейности (да/нет) | да |