Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 314.2.50 - 50 мл
- Кат.№ 314.2.100 - 100 мл
Принцип метода [1]:
EPS α-амилаза → этилиден-G2-5 + G2-5 -pNP G2-5 -pNP α-глюкозидаза → глюкоза + pNP-глюкозид pNP-глюкозид α-глюкозидаза → глюкоза + pNP, где: EPS - этилиден-р-нитрофенилмальтогептаозид; G - глюкоза; pNP - p-нитрофенол.
Приращение оптической плотности пробы прямо пропорционально активности α-амилазы.
Исследуемый материал [2]:
- Сыворотка крови. Хранить при температуре 2-8ºС не более 30 суток.
- Моча. Образцы нестабильны в кислой среде. Довести рН образца до слабощелочного значения перед хранением. Хранить при температуре 2-8ºС не более 7 суток.
Состав набора и условия хранения:
- 1. Буфер, рН 7,1 (конечные концентрации в тесте):
HEPES - 100 ммоль/л;
MgCl2 - 10 ммоль/л;
NaCl - 50 ммоль/л;
α-глюкозидаза - 20 МЕ/л. - 2. Субстрат (конечная концентрация в тесте):
EPS- 3 ммоль/л;
Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при температуре 2-8ºС. Дата изготов-ления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
Линейность - от 16 до 1640 МЕ/л.
Коэффициент вариации - 5%.
Приготовление рабочего реагента:
Смешать буфер и раствор субстрата в соотношении 9:1. Рабочий реагент стабилен в темноте не менее 14 суток при температуре хранения 2-8 ºС.
Процедура анализа:
Непосредственно перед проведением анализа нагреть рабочий реагент до 37ºС.
λ = 405 нм.
d = 1 см.
Температура измерения 37 ºС.
Измерение против воздуха.
Внести в кювету | Макроанализ, мл | Полумикроанализ, мл | Микроанализ, мл |
---|---|---|---|
Рабочий реагент | 2,0 | 1,0 | 0,5 |
Исследуемый материал: | |||
1.Сыворотка крови | 0,08 | 0,04 | 0,02 |
2. Моча | 0,04 | 0,02 | 0,01 |
Смешать и инкубировать при 37º С в течение 3 минут. Измерить ΔЕ/мин в течение 3-х минут. Вычислить среднее значение ΔЕ/мин. Если значение ΔЕ/мин превышает величину 0,200 А/мин развести исследуемый образец физиологическим раствором, повторить анализ, а результат умножить на степень разведения. |
Расчет:
- Сыворотка крови:
- МЕ/л = 8207x ΔЕ/мин;
- Моча
- МЕ/л = 16098 x ΔЕ/мин;
- или МЕ в сутки = 16098 x ΔЕ/мин х V,
- где V - объем суточной мочи, л.
Референтные пределы [2]:
- Сыворотка крови - до 220 МЕ/л;
- Моча (случайная проба) - до 1000 МЕ/л.
- Моча суточная - до 900 МЕ/л.
Диагностическая информация [2]:
- Сыворотка крови: Активность α-амилазы у детей первых двух месяцев низкая; она повышается до уровня взрослых к концу первого года жизни.
↑. Паротит, панкреатит, обтурационная и стенгуляционная непроходимость или инфаркт кишки, эктопитеческая беременность, перфорация полового органа, заболевания желчных путей всех типов, диабетический кетоацидоз, киста или псевдокиста поджелудочной железы, перитонит, макроамилаземия, некоторые опухоли легких и яичников, почечная недостаточность, эндоскопическия ретроградная холангиопанкриатография, абдоминальная травма, повреждение черепа, вирусные инфекции, состояния после операции, алкоголь.
↓. Недостаточность поджелудочной железы, выраженный муковисцидоз, тяжелое поражение печени, панкреатэкотоимия. - Моча суточная:
См. Сыворотка крови. Однако, значения могут быть нормальными или пониженными при почечной недостаточности макроамилаземии. Амилаза в моче может оставаться повышенной в течение 2 недель после приступа острого панкреатита и может предположить образование псевдокисты.
Литература:
- Rauscher E., et al., Ber.Osster.Ges.Klin.Chem. 1981, vol.4, p.150.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). "Лабинформ", Москва,1997,стр.21-22.
Параметры программирования
Наименование набора реагентов | α-Амилаза EPS КИН (кровь) | α-Амилаза EPS КИН (моча) |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой | любой |
Метод измерения | Кинетика | Кинетика |
Длина волны, нм | 405 | 405 |
Измерение против | воздуха | воздуха |
Температура реакции, ºС | 37 | 37 |
Фактор | 8207 | 16098 |
Концентрация стандарта | – | – |
Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл) | 1000:40 | 1000:20 |
Количество измерений, не менее | 3 | 3 |
Время преинкубации, сек | 180 | 180 |
Время реакции, сек | 60 | 60 |
Единицы измерения | МЕ/л | МЕ/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 0,50 | 0,50 |
Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 | 0,00 |
Максимальное ΔЕ/мин | 0,200 | 0,200 |
Границы линейности | 16-1640 | 16-1640 |
Максимум нормы | 220 | – |
Минимум нормы | 0 | – |
Подтверждение линейности (да/нет) | да | да |