Набор для быстрого дифференцированного окрашивания биопрепаратов (кровь, эякулят, выпотные жидкости и др.)
Назначение
Ядра клеток избирательно окрашиваются гематоксилином, цитоплазма - смесью красителей в разные цвета в зависимости от типа клеток и их зрелости.
Состав
- Гематоксилин по Гаррису - 1 фл (100 мл)
- Краситель Папаниколау - 1 фл (100 мл)
- Краситель оранжевый G6 - 1 фл (100 мл)
- Литий углекислый -1 фл (3 мл)
Ход реакции
| № п/п |
Реактивы | Время (мин) | Примечания |
|---|---|---|---|
| 1 | Фиксация, жидкость Никифорова | 10-30 | Необходимо погружение всего мазка |
| 2 | Промыть спиртом нисходящей концентрации (80,70,50 %) | 2 | Наливая на стекло и покачивая слить в отработанный. |
| 3 | Промыть водой | 2-3 | Первый стакан |
| 4 | Гематоксилин по Гаррису | 2-8 | Слить в тот же флакон через воронку с фильтром |
| 5 | Промыть в воде, оставить посинеть | 5 | Второй стакан. Контроль под микроскопом окраски ядер |
| 6 | Дифференцировать 0,25% раствором соляной кислоты | 1 | Покачивая до покраснения препарата, слить. |
| 7 | Опустить на 1 мин в слабый раствор углекислого лития для посинения ядер (3 капли углекислого лития на 100 мл дистиллированной воды). Промыть в воде. | 1-2 | Четвертый стакан. Контроль под микроскопом окраски ядер |
| 8 | Тщательно обезводить через спирт повышающейся концентрации 50,70,80,96 % | 2 | |
| 9 | Оранж G налить на стекло | 1-2 | Покачивать. Слить во флакон для отработанной окраски. Наливать на стекла, сливать до стекания чистых капель |
| 10 | Промыть спиртом 960 | 2 | Контроль под микроскопом |
| 11 | Окрасить красителем Папаниколау | 2-20 | Покачивать. Сливать во флакон для отработанной краски |
| 12 | Промыть спиртом 960 | 1-3 | Контроль под микроскопом влажного препарата |
| 13 | Промакнуть фильтровальной бумагой | 2 | |
| 14 | Ксилол | 3 | Быстро. Покачивать до просветления препарата. Слить во флакон для отработанного ксилола |
| 15 | Бальзам, покровное стекло | Удалить пузырьки воздуха. | |
| 16 | Туалет стекла, надписать номер анализа и год | Номер и год пишут мягким грифельным карандашом на свободном конце стекла, смазанном тонким слоем бальзама |
Результаты окраски
Ядра клеток - сине-фиолетового цвета, с четкой структурой хроматина, при которой заметны краевой гиперхроматоз, пикноз, лизис и ядрышки. Цитоплазма окрашена контрастно: при базофилии - в зеленый цвет различной интенсивности, определяемой плотностью цитоплазмы; при ацидофилии - от бледно-желтого до ярко-оранжевого у зрелых клеток. В случае неполного ороговения цитоплазмы возможна окраска части ее в зеленые тона, другой части - в оранжевые.