Набор реагентов ГонадотропинИФА-ХГч-1 предназначен для количественного определения концентрации хорионического гонадотропина в сыворотке крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Набор ГонадотропинИФА-ХГч-1 рассчитан на проведение анализа в дубликатах 40 неизвестных, 6 калибровочных проб, одной пробы контрольной сыворотки и одной пробы для определения оптической плотности раствора ТМБ при использовании всех стрипов одновременно (всего 96 определений).
Примечание: в случае дробного применения набор может быть использован только в течение месяца после вскрытия компонентов набора.
Состав набора
- Комплект из двенадцати восьмилуночных стрипов в рамке с иммобилизованными на внутренней поверхности лунок моноклональными антителами к ХГ, маркирован «Стрипы с моноклональными антителами к ХГ» - 1 пакет;
- калибровочные пробы на основе сыворотки крови, аттестованные по Третьему международному стандарту ХГ человека WHO 75/537, содержащие известные количества ХГ - 0; 15; 50; 125; 250 и 500 МЕ/л; концентрации ХГ в калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин, точные величины указаны на этикетках флаконов - 6 флаконов (лиофилизованные препараты или жидкости по 0,5 мл);
- конъюгат анти-ХГ-пероксидаза, маркирован «Конъюгат Е» - 1флакон (18 мл);
- концентрированный буферный раствор для промывки лунок, маркирован «Буфер Р» - 1флакон (14 мл);
- раствор тетраметилбензидина, маркирован «Раствор ТМБ» - 1флакон (14 мл);
- стоп-реагент (1 Н соляная кислота), маркирован «Стоп-реагент» - 1флакон (14 мл).
- буфер для разведения образцов сыворотки крови, маркирован «Буфер Д» - 1флакон (20 мл);
- контрольная сыворотка с известным содержанием ХГ маркирована «Контрольная сыворотка» - 1флакон (лиофилизованный препаратили жидкость 0,5 мл);
- пакет полиэтиленовый закрывающийся закрывающийся (при упаковке стрипов в пакет из 2-слойного полиэтилена).
Аналитические характеристики набора
1. Специфичность. Не обнаружено перекрестной реакции обоих моноклональных антител к β -субъединице ХГ с тиреотропным, лютеинизирующим и фолликулостимулирующим гормонами человека.
2. Коэффициент вариации результатов определения ХГ в одном и том же образце с использованием набора ГонадотропинИФА-ХГч-1 не превышает 8%.
3. Линейность. Зависимость концентрации ХГ в образцах сыворотки крови при разведении их буфером Д имеет линейный характер в диапазоне концентраций 15- 500 МЕ/л и составляет 90-110%.
4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» ХГ - соответствие измеренной концентрации ХГ предписанной в пробе, полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 50 МЕ/л. Процент открытия составляет 90-110%.
5. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором концентрация ХГ в сыворотке крови человека не превышает 5 МЕ/л.
6. Хук-эффект высоких концентраций. В наборах реагентов, основанных на «сэндвич»-принципе анализа, при высоких концентрациях аналита зависимость величины оптической плотности от концентрации становится обратно пропорциональной (так называемый хук-эффект высоких концентраций). При использовании набора Гонадотропин ИФА-ХГч-1 хук-эффект не обнаружен вплоть до концентрации ХГ 400 000 МЕ/л.
7. Клиническая проверка. Концентрация ХГ у 200 здоровых доноров обоих полов в возрасте 18-40 лет не превышала 10 МЕ/л. В таблице приведены значения ожидаемых показателей ХГ у женщин на различных сроках нормально протекающей беременности и соответствующие им рекомендуемые разведения анализируемой сыворотки крови перед проведением анализа.
Таблица
Срок беременности, недель после зачатия | Медиана, МЕ/л | Толерантные пределы, МЕ/л | Рекомендуемое разведение сыворотки |
---|---|---|---|
2 | 150 | 50-300 | без разведения |
3-4 | 2 000 | 1 500-5 000 | 1: 20 |
4-5 | 20 000 | 10 000-30 000 | 1:400 |
5-6 | 50 000 | 20 000-100 000 | 1:400 |
6-7 | 100 000 | 50 000-200 000 | 1:400 и 1:2000 |
7-8 | 80 000 | 40 000-200 000 | 1:400 и 1:2000 |
8-9 | 70 000 | 35 000-140 000 | 1:400 |
9-10 | 65 000 | 32 500-130 000 | 1:400 |
10-11 | 60 000 | 30 000-120 000 | 1:400 |
11-12 | 55 000 | 27 500-110 000 | 1:400 |
13-14 | 50 000 | 25 000-100 000 | 1:400 |
15-16 | 40 000 | 20 000-80 000 | 1:400 |
17-21 | 30 000 | 15 000-60 000 | 1:400 |
8. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения концентраций ХГ, соответствующие нормальным.