Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ С42.1.50 - 50 мл + 0,5 мл
- Кат.№ С42.5.50 - 5 х 50 мл + 5 х 0,5 мл
Принцип метода:
β-D-глюкоза + ATФ ← Гексокиназа → глюкозо-6-фосфат +АДФ
Глюкозо-6-фосфат + НАД+ ← Глюкозо-6-фосфат- дегидрогеназа → глюконат-6-фосфат + НАДН
Количество образовавшегося НАДН пропорционально концентрации глюкозы в исследуемом образце. Данный метод обладает 100% специфичностью по отношению к β-D-глюкозе, так как глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа взаимодействует исключительно с глюкозо-6-фосфатом.
Исследуемый материал:
- Сыворотка крови. Быстро отделить от клеток для предупреждения потерь. Образцы стабильны в течение 8 часов при температуре 18-25°С или 3 суток при 2-8°С.
- Плазма крови. Консервант - фторид натрия или иодацетат. Образцы стабильны в течение 24 часов при температуре 18-25°С.
- Моча. Собирать в темную посуду на льду. Консерванты для суточной мочи - 5 мл ледяной уксусной кислоты или 5 г бензоата или фторида натрия.
- Ликвор. Исследовать немедленно во избежание ложно низких результатов. Хранить при - 20°С.
Состав набора и условия хранения:
- Good's буфер, 100 ммоль/л, рН 7,6:
- АТФ - 4 ммоль/л;
- НАД+ - 3 ммоль/л;
- Раствор ферментов:
- Гексокиназа > 1 000 МЕ/л;
- Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа > 3 000 МЕ/л;
- Калибратор - 5,55 ммоль/л.
Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при температуре 2-8°С в темноте.
Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.
Аналитические характеристики набора:
- Линейность - от 1,0 до 38,9 ммоль/л;
- Значение коэффициента вариации - 5 %.
Приготовление реагента:
Смешать буфер и раствор ферментов в соотношении 100 : 1. Рабочий реагент стабилен не менее 3 месяцев при температуре хранения 2-8°С или 2 недели при 18-25°С.
Процедура анализа:
Компоненты | Опытная проба | Калибратор | Контроль на реактивы |
---|---|---|---|
Рабочий реагент, мл | 350 | 350 | 350 |
Исследуемый образец, мл | 3 | --- | --- |
Калибратор, мл | --- | 3 | --- |
Вода, мл | --- | --- | 3 |
Смешать и инкубировать 5 минут при температуре 37°С. По окончании инкубации измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против контроля на реактивы при λ= 340 нм и d = 1 см. Окраска стабильна в течение 30 минут. |
Расчет:
Референтные пределы:
- сыворотка (плазма крови) - 4,1-5,9 ммоль/л;
- моча - 0,1-0,8 ммоль/л;
- моча суточная - < 2,78 ммоль/сутки;
- ликвор - 2,2-3,9 ммоль/л.
Диагностическая информация:
1. Сыворотка (плазма) крови.
↑. Первичное: сахарный диабет. Физиологическое: физическая нагрузка, шок, ожоги. Эндокринные заболевания: феохромоцитома, тиреотоксикоз, акромегалия, гигантизм, синдром Кушинга, глюкагонома. Заболевания поджелудочной железы: острый и хронический панкреатит, панкреатит при паротите, муковисцидозе, гемахроматозе, опухоль поджелудочной железы. Связанное с другими заболеваниями: кровоизлияние в мозг, острый инфаркт миокарда, хронические заболевания печени или почек.
↓.Заболевания поджелудочной железы: опухоль островковых клеток, дефицит глюкагона. Опухоли: рак надпочечника, рак желудка, фибросаркома. Тяжелые заболевания печени.Эндокринные заболевания: гипопитуитаризм, болезнь Аддисона, гипотиреоз.
2. Моча.
↑. Любые случаи повышения глюкозы в крови, эндокринные заболевания (сахарный диабет тиреотоксикоз, акромегалия, гигантизм, синдром Кушинга, гиперплазия коры надпочечников), большая травма, паралич, инфаркт миокарда или сосудистый коллапс, пероральный прием кортикостериодов, ожоги, инфекции, феохромоцитома.
3. Ликвор.
↑. Диабетическая гипергликемия, эпидермический энцефалит, сифилитическое поражение ЦНС, повышение уровня глюкозы в сыворотке.
↓. (Легкое) Субарахноидальное кровоизлияние, небактериальный менингоэнцефалит.
↑. Острый гнойный менингит, туберкулезный менингит, криптококковый менингит, первичный амебный менингоэнцефалит, энцефалит при паротите, первичная или метастатическая опухоль мягкой мозговой оболочки, саркоидоз.
Литература:
- Ammon H., et al., Schweiz. Wschr., 1970, vol.100, p.1317
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). «Лабинформ», Москва,1997, .159-163.
Параметры программирования:
Наименование набора реагентов | Глюкоза НК |
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) | любой |
Метод измерения | КТ |
Длина волны, нм | 340 |
Измерение против | реагент бланка |
Температура реакции, °С | 37 |
Фактор | - |
Концентрация стандарта | 5,55 |
Объем реагента (мкл) | 350 |
Объем исследуемого образца (мкл) | 3 |
Количество измерений, не менее | 1 |
Время преинкубации, сек | - |
Время реакции, сек | 300 |
Единицы измерения | ммоль/л |
Верхний предел реагент бланка, А | 2,00 |
Нижний предел реагент бланка, А | 0,00 |
Максимальное DЕ/мин | - |
Границы линейности | 1,0-38,9 |
Максимум нормы | 5,9 |
Минимум нормы | 4,1 |
Подтверждение линейности (да/нет) | нет |