Только для IN VITRO диагностики!
- Кат.№ 301. 1.100 - 100 определений (2 мл)
- Кат.№ 301. 1.250 - 250 определений (5 мл)
Принцип метода [1]:
Определение содержания С-реактивного белка (СРБ) основано на взаимодействии СРБ исследуемой пробы со специфическими антителами против СРБ человека, иммо-билизованными на поверхности латексных частиц. При смешивании анти-СРБ латекса с сывороткой крови, содержащей СРБ в концентрации превышающей 6 мг/л, в результате реакции между антителами к СРБ и СРБ развивается визуально регистрируемая агглютинация латексных частиц, что свидетельствует о положительной реакции пробы.
Исследуемый материал [2]:
Сыворотка крови. Использование гемолизированных и липемичных образцов недопусти-мо. Образцы, содержащие частицы фибрина, перед анализом необходимо центрифугировать. Образцы стабильны не более 8 суток при температуре 2-8°С.
Состав набора и условия хранения:
- Анти-СРБ латекс
- Буфер
- Позитивный калибратор - концентрация СРБ > 6 мг/л
- Пограничный калибратор - концентрация СРБ ~ 6 мг/л
- Негативный калибратор - концентрация СРБ < 6 мг/л
- Тест-пластина и шпатели.
Реагенты стабильны при температуре хранения 2-8°С в течение 18 месяцев. Дата изготовления, срок годности, серия и номер по каталогу указаны на упаковке набора.
Подготовка реагентов к процедуре анализа:
Оптимальная температура реагентов и окружающей среды при проведении анализа 22-25°С. При температуре ниже 18°С возможно получение ложных результатов.
Анти-СРБ-латекс перед использованием следует перемешать осторожным встряхиванием.
Анализ:
I. Качественное определение:
Поместить в индивидуальные лунки тест-пластины калибраторы и исследуемые образцы сыворотки в объеме 20 мкл. Внутрь каждой лунки добавить по 20 мкл анти-СРБ латекса. Быстро перемешать содержимое капель исследуемого образца и анти-СРБ латекса в каждой лунке индивидуальным шпателем до гомогенного состояния.
Перемешивать реакционную смесь круговыми движениями тест-пластины на механической орбитальной мешалке или вручную со скоростью 80-100 об/мин в течение 2 минут. Процесс агглютинации следует регистрировать в течение 1 минуты после окончания движения тест-пластины. Существенное увеличение временного промежутка между остановкой тест-пластины и фиксацией результата может привести к регистрации ложной агглютинации, возникающей в процессе подсыхания реакционной смеси.
Интерпретация результатов:
1. Четко видимые агрегаты латексных частиц - концентрация СРБ > 6 мг/л.
2. Мелкие агрегаты - концентрация СРБ ~ 6 мг/л.
3. Равномерно-гомогенная молочная суспензия - концентрация СРБ < 6 мг/л.
II. Полуколичественное определение:
Приготовить разведения исследуемых проб с помощью буфера в соответствии с таблицей
Таблица
Соотношение исследуемая проба/ буфер | Содержание СРБ (мг/л), (С) |
---|---|
1 : 1 | 12 < С < 18 |
1 : 2 | 18 < С < 24 |
1 : 3 | 24 < С < 30 |
1 : 4 | 30 < С < 36 |
и т.д. |
Провести анализ полученных разведений в соответствие с п. I.
Конечным результатом анализа считать пробу с наибольшим разведением, давшим реакцию агглютинации.
Референтные пределы [3]:
- до 6 мг/л.
Специфичность:
Используемые антитела обладают высокой специфичностью по отношению к СРБ человека и не проявляют перекрестных реакций с другими белками сыворотки в условиях теста.
ВНИМАНИЕ!
Не допускать замораживания набора при хранении, так как это приводит к утрате способности анти-СРБ латекса к реакции агглютинации, а следовательно к получению ложно-отрицательных результатов.
Диагностическая информация [3]:
Воспаление, некроз ткани, травма. В отличие от других белков острой фазы, СРБ не подвержен влиянию гормонов. Лечение противовоспалительными препаратами может сильно снижать уровень СРБ. По сравнению с другими белками острой фазы уровень СРБ возрастает наиболее резко. Реакция СРБ на воспаление наблюдается даже у новорожденных, когда его уровень особенно важен для диагностики бактериального сепсиса. Уровень СРБ существенно не возрастает при вирусной и спирохетной инфекции. Поэтому в отсутствие травмы высокие значения могут указывать на наличие бактериальной инфекции. Последовательное определение уровней СРБ может быть использовано для наблюдения за эффективностью антимикробного лечения. После хирургического вмешательства уровень СРБ повышен в острый период, однако, быстро снижается в отсутствие бактериальной инфекции, что позволяет использовать его для контроля за возникновением такой инфекции. Исследование СРБ также находит применение при диагностике таких заболеваний, как ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром васкулита, инфаркт миокарда [3].
Литература:
- Perys, Lancet, 1981, 653-657.
- Warworth, et al., Clin. Chim. Acta, 1984, vol.138.
- Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). «Лабинформ», Москва,1997, стр. 428-429.
Внимание!
Для дезинфекции слайд-пластины следует использовать дезинфектанты на основе свободного хлора - такие, как "Хлорамикс", "ДП-2Т", "Жавель солид", «Хлорапин".
Недопустимо использование средств на основе перекиси водорода и фтора, в частности "Абсолюцид окси".